Aplicação da técnica de sequenciamento em célula individual na fisiopatologia do câncer

Charlotte Cesty Borda, Camila Vega

Resumo


A análise de células individuais tem sido amplamente reconhecida como técnica chave para o entendimento das funções celulares, aprimorando as formas de diferenciação entre um tecido saudável e um doente, permitindo assim vários avanços e descobertas em diversas áreas, entre elas a neurociência, reprodução humana, microbiologia e oncologia. O avanço dessas técnicas mostra-se particularmente importante para tecidos com alto grau de variação, como tumores, podendo revelar diferenças estruturais e mutações que poderiam ser mascaradas por outras células em um sequenciamento em massa. O estudo detalhado do genoma de células individuais é capaz de mostrar funções até então desconhecidas, em células fenotipicamente idênticas em um determinado órgão, porém, vários desafios precisam ser ultrapassados. O principal desafio é extrair uma quantidade muito pequena de amostra e amplificá-la de forma a gerar quantidade suficiente de material para que seja feito um sequenciamento confiável. Lidar com baixas concentrações de DNA pode levar a degradação, perda de amostra e contaminações podendo ter um grande efeito na qualidade do sequenciamento. Devido a essas dificuldades, o objetivo deste trabalho é descrever as técnicas utilizadas para o sequenciamento de célula individual, desde a manipulação até a amplificação, mostrando a importância dessa técnica para o estudo do câncer e para o aprimoramento dos principais temas envolvidos na eficácia da terapia do câncer: detecção, progressão e predição.


Palavras-chave


sequenciamento em célula individual; câncer; célula tumoral circulante; MDA; MALBAC.

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